高壓滅菌鍋滅菌效果的驗證方法

1 試驗材料

嗜熱芽孢桿菌紙片；噬熱芽孢桿菌ATCC7053，含芽孢量5—105CFU片]121 oC壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡；溴甲酚紫胨水培養基，116~C20分鐘高壓滅菌后備用。0—150 oC留點(diǎn)溫度計

2 方法與結果

將嗜熱芽孢桿菌紙片用無(wú)菌鑷子放人密封試管中?；瘜W(xué)指示卡和留點(diǎn)溫度計放人敞口的試管中。上兩種試管各準備5—10份。分別放置在高壓滅菌鍋蒸汽口處、底部排氣口處及底部水口處或上下左右中間5處。如滅菌器為二層，則需放10處】。留點(diǎn)溫度計標化合格后可用于驗證試驗。檢測前，需將溫度計的水銀柱甩至40℃以下。每次監測后留點(diǎn)溫度計的溫差應在1oC之間，則說(shuō)明滅菌器內的溫度分布是均勻的。滅菌后的菌片應在嚴格無(wú)菌操作條件下放人滅菌后的溴甲酚紫胨水培養基內。56—60~C培養2448小時(shí)，觀(guān)察顏色變化。如培養基變?yōu)辄S色，說(shuō)明菌片中的嗜熱芽孢桿菌尚未*滅活，細菌仍可在培養基中生長(cháng)，分解葡萄糖產(chǎn)酸變?yōu)辄S色。如培養基顏色不變化仍為紫色，則說(shuō)明芽孢菌已滅活。同時(shí)要用未經(jīng)滅菌的紙片放人培養基內作為陽(yáng)性對照，不加紙片的空白培養基作為陰性對照?；瘜W(xué)指示卡上的指示色塊，在高壓蒸汽滅菌時(shí)，由淡黃色變?yōu)楹谏?。隨著(zhù)顏色變化的深淺，并與對照色相比，可判斷滅菌效果是否達到要求?；瘜W(xué)指示卡應在干燥處保存。遇潮會(huì )變色，影響滅菌效果的觀(guān)測。高壓蒸汽滅菌必須使蒸汽順利進(jìn)入滅菌器內，與滅菌物品接觸，并將原有的冷空氣排出方可達到滅菌的效果。要進(jìn)行空載熱分布和滿(mǎn)載熱穿透力驗證(滿(mǎn)載時(shí)不超過(guò)總體積的2／3)。二種驗證各重復三次，共做六次見(jiàn)表。5個(gè)點(diǎn)六次試驗表明溫度均在121 oC，化學(xué)指示卡變黑；程度與對照色一致；培養基均未改變顏色，說(shuō)明高壓蒸汽滅菌效果合格。