使用瓶子凍原液，這個(gè)過(guò)程中會(huì )出現什么問(wèn)題。

首先我們了解一下裝有原液的瓶子在哪里凍？

1. 把瓶子放入極冷的液體里面，
2. 在超低溫冰箱里面存放
3. 在速凍箱里面存放

這三種情況的優(yōu)缺點(diǎn)：

在種情況，凍的過(guò)程省時(shí)，但是極速冷凍的時(shí)候瓶子會(huì )出現大量的冰晶，而不是大塊的冰。大量的小冰晶的出現使得溶液中蛋白和冰接觸的表面積劇增。同時(shí)溶液中大量細微的空氣和蛋白混在一起，在融的過(guò)程中，影響蛋白的活性。

第二種情況，是很多客戶(hù)現在正在使用的方法。直接放在℃的冰箱中。

               如果放一個(gè)5L的瓶子，（Thermo冰箱的現在4層，每層高度也只能放5L）

               在超低溫里面10-12個(gè)小時(shí)，如果多放幾個(gè)所需時(shí)間成倍的增加。

              有數據 表明，冰箱內放置24個(gè) 5L的瓶子，每個(gè)瓶子放3.5L的液體。設定溫度在-40℃，總共液體體積84L，所需時(shí)間100小時(shí)以上。后一個(gè)瓶子*凍?。x開(kāi)冰點(diǎn)）需要80個(gè)小時(shí)左右。

這樣長(cháng)時(shí)間緩慢冷凍，單個(gè)瓶子蛋白濃度會(huì )發(fā)生極大的不均勻。有數據表明在17小時(shí)的冷度，瓶子內部的濃度變化就會(huì )在10倍左右。如果80倍的話(huà)。濃度變化值則差別更大。

    同時(shí)，壓縮機 長(cháng)時(shí)間不停歇工作，超低溫冰箱可能會(huì )出現故障（過(guò)熱），

第三種情況，速凍箱，具有和冰箱一樣溫度范圍，降溫速度快，同時(shí)機器帶有風(fēng)扇，空氣可以充分循環(huán)，這種腔體很多帶有加溫設備，溫度均一性很好。一般在-70℃下，空載+/-3℃以?xún)?，滿(mǎn)載+/-2℃

由于速凍箱內部有大面積風(fēng)扇，腔體能很好空氣流通。

有數據 表明，冰箱內放置24個(gè) 5L的瓶子，每個(gè)瓶子放3.5L的液體。設定溫度在-40℃，總共液體體積84L，所需時(shí)間10小時(shí)左右。

這個(gè)時(shí)間長(cháng)短是大多數用戶(hù)可以接受的。 大部分的科研認為10幾個(gè)小時(shí)完成冷凍，單抗的活性影響不大。

現在說(shuō)說(shuō)瓶子凍融的優(yōu)缺點(diǎn)。

每種不同體積大小的瓶子的時(shí)間差距明顯，這樣做工藝開(kāi)發(fā)的時(shí)候只能使用同樣體積大小的瓶子

體積越大，時(shí)間越長(cháng)。

凍瓶子很多種情況，瓶子底部都會(huì )突出，也就是瓶子會(huì )變形。

瓶子的存儲空間會(huì )很大。

瓶子中的液體會(huì )出現冷凍，開(kāi)裂，再冷凍的反復凍融情況。

1個(gè)瓶子，5個(gè)瓶子，10個(gè)瓶子的冷凍曲線(xiàn)不一致。

在存取方面：

瓶子的優(yōu)點(diǎn)，拜訪(fǎng)方便。拿取方便，存儲方便。但是占據關(guān)鍵大。

瓶子的分裝和Drain不方便。整個(gè)無(wú)菌過(guò)程不符合GMP要求。如果使用多孔的蓋子和管路，····分裝和排空這個(gè)過(guò)程就能保證無(wú)菌了。但是在冷凍和存儲又出現不安全隱患。

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